
做 mRNA 研究的你,是否也在為這個問題頭疼? 樣品里 Poly(A) 尾長度分布那么寬,到底該怎么準確定量?
為什么需要關注Poly(A)尾?
目前,全球正迎來mRNA技術發展浪潮,其應用覆蓋基礎科研、疫苗以及核酸藥物等多個研究領域,從基礎分子機制研究,直至IND/BLA 申報階段的質量控制,Poly (A) 尾長度是 mRNA不-可或缺的核心質量屬性。
mRNA 3'端的Poly (A) 尾可與PABP蛋白結合,并與5’端帽子結構形成環狀復合體,進而促進翻譯的起始;同時能夠抵御外切核酸酶介導的降解,調控mRNA在細胞內的半衰期。已有研究證實,Poly (A) 尾并非越長越好:只有維持在合適的長度,才能兼顧mRNA 穩定性與蛋白表達效率。如若Poly(A)尾長度不均一,或實際長度偏離設計值,將直接導致蛋白表達量下降、藥效不穩定,這無疑會給mRNA疫苗和核酸治療藥物埋下巨大隱患。
在體外轉錄合成mRNA的工藝中,無論采用模板編碼 Poly (A),還是通過酶促反應進行加尾,產物均天然存在Poly(A)尾長異質性。因此,精準表征 poly (A) 尾的長度分布與平均長度,是mRNA 研發過程中至關重要的核心質控環節。
現實困境:為什么 poly (A) 尾長度檢測總 “測不準"?
?? 傳統質譜(MS)法:檢測結果準確可靠,但設備購置成本高昂、樣本前處理流程復雜,同時會生成海量數據,解析難度大;
?? 市售商品化Ploy(A)尾長度標準品:普遍混有非A堿基,極易引入系統誤差,難以作為高精度參照/對照品。
針對mRNA Poly(A)尾檢測的現有難點,填補當前Poly (A) 尾質控標準品的市場空白,TriLink BioTechnologies公司重磅推出ContrOligo™ PolyA RNA Standard——精準可控的Poly(A)尾長度標準品。
產品介紹: 一句話介紹該產品“是什么"?
ContrOligo™ Poly(A) RNA 標準品為化學合成的、序列長度確定的Poly(A) RNA寡核苷酸。該產品可用作分析對照品,主要應用于RNA分析流程中質譜(MS)或高效液相色譜(HPLC)的校準。
產品特點:更深一步的了解
? 純腺苷酸組成:產品僅由腺苷酸構成,不含任何外來堿基,可有效降低標準品帶來的系統性檢測偏差;
? 為6種確定序列長度的Poly(A) RNA寡核苷酸:長度分別為40A、60A、80A、100A、120A、140A
? 批間差穩定:每批次產品均經廠家嚴格的質控,可提供CoA,驗證數據齊全;
? 使用方便,為即用型;
? 規格、形式靈活:可提供單支裝、套裝以及定制形式;產品規格有2nmol和10nmol,前者多用于質譜檢測,后者適用于高效液相色譜實驗;
? 庫存充足:貨期穩定。
五大核心優勢:給結果應有的底氣
1. 快速產出數據
無需繁瑣的前期樣本制備,無需搭建新的實驗方法,可直接對接現有分析流程,大幅縮短實驗周期,快速輸出有效實驗數據;
2.質控嚴格,確保數據可信
產品經過嚴格的質控,采用IPRP?LCMS 方法確認目標分子量(誤差±5 Da),并借助陰離子交換高效液相色譜(AX HPLC) 測定其純度(≥90%),為 poly (A) 尾分析、RNA質控、方法學的建立提供保障。
3. 批次可控,數據可溯可復現
每一批次產品均可提供完整的CoA、QC 數據,結果可溯源、可復現。
4. 法規審評可信度高
產品經過嚴格的性能驗證,并配套全流程的質控記錄與物料表征資料,支持 IND 及 BLA 的方法學驗證。
5. 全范圍覆蓋,適配多樣檢測需求
產品體系涵蓋40A、60A、80A、100A、120A、140A六種確定序列長度的Poly(A) RNA寡核苷酸,覆蓋主流mRNA Poly(A)尾長檢測區間,可滿足絕大多數mRNA質控、分析、方法學建立的實驗需求。
技術硬實力:用數據說話
上圖為采用含100mM乙酸辛基銨的反向色譜(RP)體系,對ContrOligoTM 標準品混合物(40A/60A/80A/100A/120A,藍色色譜圖)與標準尾長80A、經RNase T1/A酶切后的mRNA樣本(紫色色譜圖)進行分離檢測。基于 ContrOligo 標準品保留時間構建線性擬合曲線,計算得出該酶解 mRNA 的 Poly (A) 尾長為 89A;而質譜(MS)實測尾長為 84A。驗證了該檢測方法與標準品體系的準確性。
適配人群與應用場景
1. mRNA基礎研究課題組
針對Poly(A)尾調控RNA穩定性、蛋白翻譯機制等基礎研究場景,可作為分析對照標準品,用于電泳、色譜檢測結果的校準與校正,有效保障基礎實驗數據的準確性與可信度。
2. mRNA疫苗與核酸藥物研發團隊
適用于核酸藥物、mRNA疫苗的工藝優化、生產質控等全流程,可精準測定樣品中的Poly(A)尾長及分布特征,輔助產品工藝迭代與常態化質量檢測。
3. 分析方法開發人員
適用于IP-RP-LC、毛細管電泳CE等主流檢測平臺的方法搭建與體系優化,可用于構建標準曲線、完成方法學建立與優化。
4. 新藥申報階段生物醫藥企業
產品經過全面理化表征,每批次均可提供CoA與QC等完整實驗數據,支持IND、BLA申報對應的方法學驗證工作,滿足商業化藥物研發的合規申報要求。
產品形式與選擇
1. 單支裝形式
產品為單一確定序列長度的Poly(A) RNA標準品,通常適用于定向方法開發或單點校準。
2. 套裝形式
產品包含全部6種確定序列長度的Poly(A):40A,60A,80A,100A,120A,140A.一次采購即可滿足大部分的分析需求。
3. 定制形式
可根據客戶的高通量檢測需求進行產品定制,適用于常態化生產質量控制以及高通量實驗需求。
具體訂購信息
產品名稱 | 目錄號 | 規格 |
ContrOligo™ PolyA RNA Standard, 40A | O-5001-40A | 2 nmole、10 nmole |
ContrOligo™ PolyA RNA Standard, 60A | O-5001-60A | 2 nmole、10 nmole |
ContrOligo™ PolyA RNA Standard, 80A | O-5001-80A | 2 nmole、10 nmole |
ContrOligo™ PolyA RNA Standard, 100A | O-5001-100A | 2 nmole、10 nmole |
ContrOligo™ PolyA RNA Standard, 120A | O-5001-120A | 2 nmole、10 nmole |
ContrOligo™ PolyA RNA Standard, 140A | O-5001-140A | 2 nmole、10 nmole |
ContrOligo™ PolyA RNA Standard Kit | O-5001-2NM-Kit / O-5001-10NM-Kit | 2 nmole、10 nmole |
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